為什么要進(jìn)行細(xì)胞鑒定？
1.什么是細(xì)胞系鑒定？
所謂細(xì)胞系鑒定即通過STR（短串聯(lián)重復(fù)序列）圖譜所建立細(xì)胞系的遺傳特征。一株細(xì)胞系的遺傳特征確立后，細(xì)胞系可以通過定期的檢測(cè)，以防止出現(xiàn)細(xì)胞系被誤認(rèn)或交叉污染的情況。
2.為什么要進(jìn)行細(xì)胞系鑒定？
首先進(jìn)行細(xì)胞系STR鑒定是很重要的。很多生物醫(yī)藥的研究都采用培養(yǎng)細(xì)胞來進(jìn)行，這些細(xì)胞可能是受贈(zèng)于其它研究人員,也可能是從細(xì)胞庫(如美國(guó)ATCC,AmericanTypeCultureCollection)得來。據(jù)估計(jì)，15-20%的實(shí)驗(yàn)室，實(shí)驗(yàn)中所使用的細(xì)胞已經(jīng)不是原來的細(xì)胞系，或者與其它細(xì)胞系發(fā)生了交叉污染。顯然，細(xì)胞系遭到污染、特征鑒別錯(cuò)誤，將會(huì)極大的威脅著基于這些細(xì)胞而發(fā)表的論文質(zhì)量和研究發(fā)現(xiàn)的正確性。為此，很多細(xì)胞庫現(xiàn)在都要對(duì)提交來的細(xì)胞系進(jìn)行鑒定，并對(duì)細(xì)胞系之間的交叉污染進(jìn)行監(jiān)測(cè)。
現(xiàn)在很多機(jī)構(gòu)都已經(jīng)認(rèn)識(shí)到這個(gè)的重要性，ATCC和FDA，這些機(jī)構(gòu)要求對(duì)用于制藥領(lǐng)域的實(shí)驗(yàn)中所使用的材料—諸如細(xì)胞系—應(yīng)該進(jìn)行“身份鑒定”和純度測(cè)試。很多雜志也要求使用細(xì)胞系的文章提供STR指紋圖譜數(shù)據(jù)。
FDA建議研究人員在培養(yǎng)細(xì)胞的較早階段(細(xì)胞培養(yǎng)第一周)來鑒定細(xì)胞系的身份。細(xì)胞在被凍存前應(yīng)再一次進(jìn)行鑒定；對(duì)于活躍生長(zhǎng)的細(xì)胞，每?jī)蓚€(gè)月應(yīng)鑒定一次；文獻(xiàn)發(fā)表前也應(yīng)對(duì)細(xì)胞系身份進(jìn)行鑒定。
如果一個(gè)實(shí)驗(yàn)室使用不止一種細(xì)胞系，則應(yīng)在實(shí)驗(yàn)開始時(shí)，就要對(duì)所有的細(xì)胞系進(jìn)行鑒定，以便排除交叉污染。
這樣將減少由于細(xì)胞系發(fā)生交叉污染或身份誤認(rèn)，將導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的無效或數(shù)據(jù)誤導(dǎo)。
3.如何進(jìn)行細(xì)胞系鑒定？
細(xì)胞系鑒定目前主要基于身份認(rèn)證委員會(huì)的標(biāo)準(zhǔn)。依據(jù)該標(biāo)準(zhǔn)，可以通過多重?zé)晒釶CR技術(shù)，對(duì)人源8個(gè)STR位點(diǎn)以及1個(gè)性別決定位點(diǎn)進(jìn)行檢測(cè)。
4.什么時(shí)候需細(xì)胞系鑒定？
1）當(dāng)建立或獲得一個(gè)新的細(xì)胞系時(shí)；
2）一個(gè)涉及到細(xì)胞試驗(yàn)項(xiàng)目開始/結(jié)束時(shí)；
3）在細(xì)胞凍存之前，或細(xì)胞已連續(xù)培養(yǎng)2～3個(gè)月時(shí)；
4）發(fā)表文章或申請(qǐng)課題經(jīng)費(fèi)前；
5）細(xì)胞系表現(xiàn)不穩(wěn)定或結(jié)果與預(yù)期差別較大時(shí)；
6）當(dāng)實(shí)驗(yàn)室使用超過一種細(xì)胞系時(shí)，所有細(xì)胞系先鑒定以排除交叉污染的可能。