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      細(xì)胞常見(jiàn)的幾種污染源

        案例分析     |      2022-05-08 21:35:16
      細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中如果操作不當(dāng)或者條件控制不合適見(jiàn)容易受到化學(xué)或者生物因素的污染,常見(jiàn)的污染源有:

          1.細(xì)菌污染
          細(xì)菌污染是實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)中常見(jiàn)的污染,即使在細(xì)胞培養(yǎng)液中加入了抗菌素,也可能因?yàn)椴僮鞑簧鞫鹞廴尽3R?jiàn)的有革蘭氏陽(yáng)性菌,如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌,其中又以白色葡萄球菌較常見(jiàn)。

          培養(yǎng)細(xì)胞受細(xì)菌污染后,會(huì)出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁,pH改變。污染后細(xì)胞發(fā)生病理改變,胞內(nèi)顆粒增多、增粗,最后變圓脫落死亡。

          2.真菌污染
          真菌污染是細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中最常見(jiàn)的一種,最常見(jiàn)的真菌有煙曲霉、黑曲菌、孔子霉、毛霉菌、白色念珠菌和酵母菌。

          培養(yǎng)細(xì)胞受真菌污染后,可見(jiàn)培養(yǎng)液中漂浮著白色或淺黃色的小點(diǎn),有的散在生長(zhǎng),培養(yǎng)液一般不發(fā)生混濁;倒置顯微鏡下可見(jiàn)絲狀、管狀或樹(shù)枝狀的菌絲縱橫交錯(cuò)在細(xì)胞之間或培養(yǎng)基中,有的呈鏈狀排列。

          真菌污染后,細(xì)胞生長(zhǎng)變慢,但最后由于營(yíng)養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細(xì)胞脫落死亡。

          3.支原體污染
          支原體是介于細(xì)菌與病毒之間能獨(dú)立生活的最小微生物,最小直徑0.2μm,一般過(guò)濾除菌無(wú)法去除它,光鏡下難以看清它的形態(tài)結(jié)構(gòu)。開(kāi)始不易發(fā)現(xiàn),能在偏堿條件下生存,對(duì)青霉素有抗藥性。多吸附于細(xì)胞表面或散在于細(xì)胞之間。

          培養(yǎng)細(xì)胞受支原體污染后,部分敏感細(xì)胞可見(jiàn)細(xì)胞生長(zhǎng)增殖變慢,部分細(xì)胞變圓,從瓶壁脫落。但多數(shù)細(xì)胞污染后無(wú)明顯變化,或略有變化,若不及時(shí)處理,還會(huì)產(chǎn)生交叉污染。

          4.病毒污染
          組織細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,如果沒(méi)有除去潛在的病毒,就會(huì)產(chǎn)生病毒污染。目前,從原代猴腎細(xì)胞的培養(yǎng)中已發(fā)現(xiàn)不少于20種血清性病毒。

          盡管病毒污染的細(xì)胞不影響原代培養(yǎng),但生產(chǎn)疫苗是不安全的。因此,潛在病毒是細(xì)胞大量生產(chǎn)和疫苗、干擾素等生物制品制作中的難題。

          5.非同種細(xì)胞污染
          由于細(xì)胞培養(yǎng)操作時(shí)各細(xì)胞株所需的器材和溶液沒(méi)有嚴(yán)格分開(kāi),往往會(huì)使一種細(xì)胞被另一種細(xì)胞污染。目前,世界上已有幾十種細(xì)胞都被HeLa細(xì)胞所污染,致使許多實(shí)驗(yàn)宣告無(wú)效。
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